微量法100T/96S
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
胰蛋白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,是一种重要的消化酶。此外,胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。
测定原理:
胰蛋白酶催化水解TAME的酯键,释放出的游离羧基与反应体系中的氢氧化钠发生中和反应,导致溶液的pH值降低,以苯酚红为指示剂,测定溶液在555nm处吸收值的变化,可以快速测得胰蛋白酶活性数据。胰蛋白酶在一定范围内与555nm处吸收值的降低呈良好的线性关系。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
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