T4 DNA连接酶

  产品参数

T4 DNA连接酶参数

英文名称：T4 DNA Ligase 

CAS号：9015-85-4

分子量：55.3kDa，单体

级别：    BR

来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌

浓度：30Weiss u/ul(6000CEU/ul）

活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量） 

酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]

保存液组分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油

10×T4 DNA Ligase缓冲液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)

抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟

注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用lvfang抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物

质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力

性状：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP

用途：生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性

保存： -20°C

公司介绍

上海恒远生物科技有限公司座落于风景秀丽的上海闵行科技工业园区内，是一家品牌试剂代理商。我司代理进口Elisa试剂盒，生物试剂，标准品，培养基。公司采用先进的检验技术及设备、人性化的办公环境,让所有员工在舒适的环境中工作和生活。公司成立以来，汇聚了一批充满活力、高效务实的技术人才和一支严密矩阵的管理队伍。同时，引进国内外的优秀企业的先进技术，更加促进了公司的进步和提高了为客户服务的能力。

安全操作

T4 DNA连接酶操作

1. 实验室的标准温度为20℃,一般检测间及试验间的温度应在20±5℃， 线值计量标准间为20±2℃，电工与无线电专业的标准间和线值计量的计量检测仪器间为20±3℃。

2. 实验室内的相对湿度一般应保持在50－70%。

3. 实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀、防磁与屏蔽等方面的环境条件应符合在室内开展的检定项目之检定规程和计量标准器具及计量检测仪器设备对环境条件的要求，室内采光应利于检定工作和计量检测工作的进行。

化学试剂纯度等级

国外试剂纯度级别说明

T4 DNA连接酶说明

Ultra Pure：超纯，与GR级相近。

High Purity：高纯，与AR级相近。

Biotech：生物技术级，与BR级相近。

Reagent：试剂级，与CP级相近。

ACS：美国化学学会标准，与AR级相近。

USP：药用级

公司其他产品温馨提示

首先要注意有效期，尽量买刚出厂不久的。大家更多的了解试剂盒无非就是担心实验能否成功，试剂盒结果出来以后如何解释。只要是商品化试剂盒，都是比较稳定的，但一般检测抗原不如检测抗体准确度高。