人内吗啡肽-2(EM-2)ELISA试剂盒仅供研究使用。
详细介绍
规格: 96T/48T
品牌:R&D BIM
种属:人.大鼠.小鼠
检测波长:450 nm
所需样本体积: 50-100ul
适用范围:仅供科研
保存及有效期:2-8℃，六个月，-20℃一年
检测目的:用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
供应的种属有：大象、牛、大鼠、小鼠、人、马、兔、大熊猫、类人猿、蜥蜴、蝌蚪、菠菜、羊、犬、鱿鱼、蜗牛、扁豆、豌豆、马铃薯、蝈蝈、豚鼠、仓鼠、金黄地鼠、鹅、鸽子、秃鹫、河马、犀牛、野猪、东北虎、斑鸠、蚯蚓、鲤鱼、眼镜蛇、青蛙、丹顶鹤、鸟类等动植物种属
实验原理
ELISA试剂盒实验原理：用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样品浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（
4800 pmol/L）
0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
样品类型
标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
样品采集
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，
试剂盒的优点
·特点：
1、灵敏度：有二层含义，1)为试剂检出被检物质的低量的能力；2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力;
2、特异性：常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标;
3、精密度：ELISA试剂一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围;
4、准确度：通过添加回收实验进行评价;
5、简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性实验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单;
6、安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性;
7、经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，而市场价格比较合理;
8、试剂评价：需要有权威的确证方法和确证的样品进行检测。
人内吗啡肽-2(EM-2)ELISA试剂盒样本信息问题解答
我能否在实验开始前一天收集样品？
◆ 除非试剂盒内说明书特别说明不允许，一般都可以。如果收集的样品不能够及时进行检测，请保存至-20℃或者按照说明书进行保存。应避免反复冻融。
◆ -20℃是推荐的冷藏保存温度。解冻的平衡过程可能会导致样品的降解。
我是否必需按照试剂盒内说明书中的方法准备样品？
◆ 推荐的样品准备方法是经过实验验证的佳的方法，所以推荐按照说明书上的方法制备样品。
我能否不用推荐的收集方法来收集血浆？
◆ 每一次按照推荐步骤操作的测定都是经过验证可行的。在某些测定中有些抗凝剂是不被推荐的。具体请参看说明书。
◆ 有些待检测的分析物也存在于血小板中，因此，推荐使用低血小板血浆。正确的收集操作方法请参看说明书。
操作步骤
用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
↓
加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照）
↓
于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml， 37℃孵育30-60分钟，洗涤,后一遍用DDW洗涤。
↓
加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
↓
终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
↓
结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
计算方法
判定Elisa试剂盒结果计算
对于新入行不久，对ELISA的结果分析这块不太熟悉。客户的实验是通过人源的蛋白作为抗原，兔源多克隆抗体作为一抗（我们就是为了通过做ELISA来检测其效价），然后通过辣根过氧化物作为二抗及显色组分。实验做完了，但不知道怎么分析结果，例如标准曲线怎么做之类的。另外，还想问一下，有没有实用的软件可用来分析。对于客户的问题回答：
间接ELISA要是试剂盒，会有标准品的，把标准品按一定浓度梯度稀释一块儿做（一般有三个重复），后酶标仪或分光光度计比色，用软件（oringe）绘制标准曲线，的出公式，按公式将样品带入公式，
用于ELISA结果计算方便的是logit曲线。曲线的横坐标用标样各浓度（ng/ml 或其他单位）的自然对数表示，纵坐标用各浓度显色值的logit值表示。Logit值的计算方法如下：
B/B0 B
Logit（B/B0）=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的显色值，B是其它浓度的显色值。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
人内吗啡肽-2(EM-2)ELISA试剂盒源自先进酶联免疫技术，涵盖国内外专家的经验与智慧。采用先进的技术和设备，确保品质的同时，降低成本，为更多有需要 的研究人员，节省实验经费，保证实验质量，多家生物科研基地合作伙伴，实力团队倾力打造专注于elisa试剂盒的生产，研发，助力科研!
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