人蛋白激酶C（PKC）ELISA试剂盒

 一.参数规格

【产品名称】：人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒

【产品用途】：被测样品定性定量分析

【产品规格】：96T/48T(两种规格)

【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】：2-8℃

【供 货 期】：1-3天(现货供应)

【产品性状】：液体盒装

【产品价格】：电议(含税含运费，我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

【ELISA检测试剂盒种属】：鹿、羊、鸡、鸭、狼、鱼、马、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、兔子、猪、猴等动植物。

【销售优势】：价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

样品采集：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

【产品保质期】：半年(六个月)

二、实验原理：

结合在固相载体表面的抗原或抗体与受检标本（抗原或抗体）起反应。用洗涤的方法洗去未结合的抗原或抗体。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分析。根据实际的应用方法，可以分成以下几种：

双抗夹心 ELISA：将捕获抗体包被在固相载体上，封闭后加入待检抗原，温育后加入酶标检测抗体，捕获抗体和检测抗体可以是针对不同表位的两种单抗，也可以是针对同一抗原的一种单抗与一种多抗，但是检测抗体需要经过酶标。

竞争ELISA：用待检抗原或抗体去干扰已经预先设计好的体系，终显色的结果与待检抗原或抗体的干扰程度成负相关。主要应用于只有一个抗原表位的蛋白检测。

多因子ELISA检测技术：多重ELISA芯片技术通过在96孔板的每个孔中以阵列的形式植入1~25种捕获抗体，随后像ELISA一样操作，通过化学发光(HRP酶)和荧光燃料(红外)来检测。

受刺激的细胞产生的细胞因子是短暂的，并且不同细胞因子基因表达的动力学是变化的。通过ELISA实验只能检测到的免疫反应性的细胞因子蛋白的含量，而这并不能完全代表细胞因子的生物活性的水平。例如，使用抗细胞因子抗体的一种ELISA不能区别如TGF-β1的细胞因子蛋白是无活性的前体形式还是有活性的成熟蛋白。此外，一种ELISA可以检测部分降解的细胞因子蛋白，它们仍有免疫反应性（例如至少可识别两个表位），当时它可能却丧失了它们的生物学活性。

三、样本处理及要求： 

1.  血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 

2.  血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成应该再次离心。  

3.  尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分） 。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 

4.  细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 

5.  组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000转/分） 。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。  

四、人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒优点：

◆精心挑选的抗体对、标准品、显色剂和酶标板全部为进口产品实现佳性能； 

◆原材料批量进口加上自配的特殊配方稀释剂保证高品质产品性能的同时兼顾成本；

◆采用先进专利技术，严格按照标准生产方案组装生产； 

◆预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10 ％； 

◆经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验； 

◆明确的敏感度； 

◆针对所有样品类型达到佳的性能； 

◆广泛的检测范围可以满足大多数检测要求； 

◆完善的售后服务和免费的技术支持免去您的后顾之忧； 

◆强大的生产能力和充足的储备、操作熟练的技术人员及高效的生产流程，随时可以组装出您定制的产品。 仅供实验大鼠、小鼠、兔等实验动物标本检测使用！

五、常见问题解答

1.　正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

2.　在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:

　(1)　固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

 （2) 包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg／ml等)进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。

  (3)　酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

　(4)　酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

六、使用指南

七、订购流程

1.绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。

2.部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。

3.部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。

八、代测服务

① 客户以快递形式送标本，上海市内客户代测样本可享我司上门取样服务。

② 客户的标本严格遵循标本的前处理原则。

③ 本公司代测服务提供真实的机读OD值结果和照片。

凡购买我司人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒，可全国各地快递免费包邮（偏远地区请特别注明运输方式），亦可根据客户需求，选择相应的运输方式，上海地区免费上门取样啦。