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首页 > 原装ELISA试剂盒 > Human Elisa kit>人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒

人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒

[商品编号]:HY-10952K

[CAS]:无

[英文名称]:Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA KIT

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:R&D

[库  存]: 100 盒

[数  量]:

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产品描述

 基本参数

【产品名称】:人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒

【产品用途】:被测样品定性定量分析

【产品规格】:96T/48T(两种规格)

【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8

【供  期】:1-3(现货供应)

【产品性状】:液体盒装
【产品价格】:电议(含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

ELISA检测试剂盒种属】:鹿、羊、鸡、鸭、狼、鱼、马、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、兔子、猪、猴等动植物。

【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
样品采集:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

【产品保质期】:半年(六个月

检测原理

Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.     酶标仪(450nm

2.     高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3.     37℃恒温箱

操作注意事项

1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.  标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12×8

12×4

标准品(80 pg/ml

0.6mL

0.6mL

按说明书进行稀释

标准品稀释液

6mL

3mL

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:8040201052.5 pg/ml

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按120稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL

4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

7.  每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


试剂盒说明

1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。

2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。

3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。

4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

8. 有效期:6个月

结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900

2.  灵敏度:低检测浓度小于1.0pg/ml

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%

5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6个月

人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒免责声明

1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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