人免疫抑制酸性蛋白（IAP）ELISA试剂盒

 人麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA试剂盒实验原理

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
试剂盒组成 
120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶
2酶标试剂3ml×1瓶8标准品（384ng/L）0.5ml×1瓶
3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份
5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张 
6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求 

液体类标本

标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

血浆：

应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

尿液、胸腹水、脑脊液：

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本：

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
 操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
192ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
96ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
48ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
24ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
12ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA试剂盒操作程序总结：

实验注明：

1.  试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。

3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。

5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。

    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

售后咨询问题

一、为什么我已经提交退款但还是没有收到？ 

    提现失败，需要充值退回的款项是原路返回的，从哪张卡上支出就会退回到哪张卡上，不能退到其他的银行卡上。需要注意有些银行支付时您是使用虚拟的电子支付卡支付的，充值退回也会退回到您的电子支付卡中（如招行支付卡、工行E通卡、农行电子支付卡）。 

二、银行账户重复扣款怎么办？ 

    由于您的支付信息银行没有即时传输给我们，造成您的银行重复扣款，我们感到非常抱歉。不过请放心，我们会在第二个工作日和银行对帐，确认您的汇款后，重复支付款项会直接充值到您的支付宝账户。 

三、如果我有问题或建议是否可以通过邮件向你们反馈？ 

    可以。请您将订单号、姓名、联系方式及相关信息写明，发送至我司邮箱，我们会尽快为您处理问题。谢谢！ 

四、公司客服工作时间？ 

    服务时间：周一至周六8:30-17:30，服务范围包括订单自助查询、订单服务、售后服务、意见与建议。如果在非工作时间我们的客服人员未能接到您的来电，我们将在第一时间给您回电！ 

五、签收时发现商品包装破损，该如何处理？ 

    您好，商品签收时如包装有破损，请您直接拒收；商品签收后如商品本身有问题，请您拨打我们的免费热线，我们将有专业的售后人员为您解决。 

同类产品推荐:

人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒
人抗原处理相关转运蛋白(TAP)ELISA试剂盒
人尿蛋白(UP)ELISA试剂盒
人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)ELISA试剂盒
人脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒
人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA试剂盒
人麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA试剂盒
人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒 
人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA试剂盒
人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA试剂盒
人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒
人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒
人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA试剂盒
人抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)ELISA试剂盒
人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA试剂盒
人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒
人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒
人精氨酸酶(Arg)ELISA试剂盒
 

人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA试剂盒使用说明书我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格，所有这些保证了我们向您提供的专业优质的服务。优惠促销，所有ELISA试剂盒均以超低折扣价让利客户，全程免费技术指导，提供免费代测服务，欢迎新老客户来电咨询详情。