【样品采集】：Elisa试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

使用目的
本试剂盒用于测定猴血清、血浆及相关液体样本中粒细胞集落刺激因子(G-CSF)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平。用纯化的猴粒细胞集落刺激因子(G-CSF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入粒细胞集落刺激因子(G-CSF)，再与HRP 标记的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中猴粒细胞集落刺激因子(G-CSF)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（2000ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个

操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1000ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
500ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
250ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
125ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
62.5ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

代测范围
1、本公司网站公布的试剂盒，可以提供代测服务。
2、本公司网站上尚未列出的试剂盒，可以代为研发和测定，费用等相关信息电话咨询。

公司责任
1、对于客户提供的样品和要测定的指标，及时提供规范的检测报告，确保数据真实可靠。未经客户允许，不得相关信息透露给第三方。

2、对于公司网站上列出的试剂盒测定指标，我们将在收到样品之日起13个工作日内提供规范的检测报告；反之，提供检测报告的时间由双方协商决定。

3、本公司的人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒检测报告仅对收到的样品负责。为了确保测定结果有效，请客户在送检前与本公司客服人员沟通，并且按照要求做好样品的数量、标签和寄送等相关事宜。

4、客户如果对测定结果不满意，务必在收到检测报告之日起起5个工作日内与本公司客服人员联系，商定解决办法。

5、在收到客户检测费起5个工作日内快递寄送加盖公章的纸质检测报告和发票。

客户责任
1、提供样品的性质（物种和组织等）和处理状况（有无特殊的化学处理等），确保样品数量和标签无误，以符合要求的方式进行包装和寄送（注意加足够的冰袋冷藏，特别娇贵的样品请用干冰）。

2、及时付款。一般在寄送样品时付费用的70%，收到电子版检测报告，确认无误后付剩下的30%。如有特殊情况需双方协商决定。

3、以上单个样品测定价格包括预测费用、试剂费用、人工费用和数据处理费用以及蛋白质含量测定费用。由于统计处理需要，一般处理每个样品应该至少测定三次（强烈建议）。如果样品中已经包括三次或三次以上重复，或者用户不需要重复测定，请用户声明。如果测定样品数量很多，可以在测定的总费用上进行适当的减免

代测的优势
1、将要测定的样品都是有研发该试剂盒的专家全权负责的，因此可以确保测定结果的准确性。

2、节省客户的宝贵时间和精力。
3、交给我们代测，您可以不必为操作经验的不成熟和仪器的缺乏而苦恼。
附加免费服务
1、根据客户研究目的，免费提供专业的检测意见和建议。
2、免费提供样品蛋白质含量测定。
3、免费提供测定结果分析，包括显著性差异、指标变化的生理生化意义和相关指标变化之间的关系等。

注意事项

一、服务承诺：

凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒，您只需将需要检测的动物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……）种类和检测指标（白介素类、激素类）及标本数量（48T/96T）通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起，现货产品二周内将检测报告交到客户手中！
欢迎临床医学界和各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作，以双赢求发展，共同进步，为中国检测事业的发展积累经验。

二、样本要求

在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10%（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.0-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

三、寄人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒 标本时需注明以下情况：

1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、联系方式；4、实验后标本是否寄回。

客户须知：

客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月