小鼠C反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒

 【产品名称】：小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒

【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】：96T/48T，盒装液体
【贮        藏】：2-8°C
【有  效  期】：Elisa试剂盒二年，我公司Elisa试剂盒均为新批次，可放心购买。
【主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。
【标        本】：血清/血浆/细胞培养上清液/组织匀浆/组织液/尿液/分泌物
【质量承诺】：我们坚持对产品质量作不断的评估、创新和改善以确保您对我们产品的高度信任。
【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
【样品采集】：Elisa试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

需要但未提供的材料 
1. 可在450nm处进行读数的酶标仪； 2. 能精确吸取10-200µL的移液器； 
3. 可调多道（8）移液器（50－200µL）； 4. 供可调多道移液器使用的试剂存放槽； 5. 洗瓶或洗板机； 6. 蒸馏水或去离子水； 7. 1升的圆柱形量筒； 
8. 移液器：1和（10或25 mL）； 9. 移液器枪头； 10. 纸巾； 
11. 计时器，用以监控温育步骤； 
12. 处理池和消毒剂（例如：0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水）；  
准备工作： 
1. 浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至 500ml)。  
小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒操作步骤： 
试剂盒应平衡至室温（20-25°C ）再试验。     取出所需反应板。 
1. 加入10ul标准品(Standards)、10ul标本于相应反应板孔中。 
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。轻轻混匀30秒，封
住板孔，室温温育 45分钟。 
3. 洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板（每孔内加入350ul洗涤液），并去除水滴
（在厚叠吸水纸上拍干）；反复洗涤5次。 
4. 每孔加入100ul显色液， 轻轻混匀10秒，室温温育20分钟。 
5. 每孔加入100ul终止液（Stop Solution）。轻轻混匀30秒；30分钟内在450nm处读OD
值。  
以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。

实验中可能出现问题       

一、所有孔未显色？

分析原因：      

1、微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。          

2、用错试剂。          

3、在操作中忘记加酶或抗体。     

 解决办法：            

1、检查洗板器械，比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。          

2、在加样前，要看清瓶签。          

3、严格按说明书操作步骤进行实验，确保每步都到位。          

二、所有孔显色偏低？

分析原因：    

1、微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。          

2、洗板不干净。          

3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。          

4、温度没达到要求。          

5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。      

解决办法：     

1、手工加蒸馏水洗板时，要避免吸头接触微孔，常更换新的蒸馏水。    

2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水（约400ul），且至少洗板五次。      

3、严格按说明书要求操作，每次取样要更换吸头。      

4、控制孵育温度在25℃。       

5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足，加样时务必将吸头内液体打尽。 

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