产品名称	兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒			适用生物	人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、猪(PoFAine)、兔(Rabbit)、鸡(Chiken)人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、猪(PoFAine)、兔(Rabbit)、鸡(Chiken)..........
产品用途	仅供科研实验，不用作临床诊断！！			进口商	上海恒远生物科技有限公司
品牌商	R&D TSZ(美国)			质量认证	ISO9001：2008 ISO13485：2003
检测范围	如：1.23-100ug/mL（详见说明书）			灵敏度	0.54ug/mL（详见说明书）
样本类型	Serum, plasma and other biological fluids
实验时长	2.5h-3h	实验方法	夹心法/竞争法	样本收集处理操作信息请联系在线客服索取
产品规格	96T/48T	价格	请咨询业务员	下载	中文版说明书英文版说明书
产品询问	可将产品相关问题发送至我司邮箱，半个工作日回复！

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样品浓度。

试剂盒组成

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒

实验过程

加样→ 孵育→ 检测抗体→ 显色→ 读数 →数据分析

数据处理及报告

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

客服服务

1品质承诺

公司的核心价值是诚信为本，质量第一，我司承诺如产品质量有问题，我们会免费更换产品或退款。

2技术服务

由从事生命科学研究的高级技术人才提供技术支持，务求协助广大科研工作者准确达成目标，共同创造骄人成绩。

3配送服务

我司在总部上海拥有自己的配送队伍，同时和各大快递公司建立了深厚的合作关系，保证产品准时到达。

样品收集、处理及保存方法

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒 使用指南

步骤	常见问题	解决方案
实验准备	1 加样器不准确；尤其10ul以下的加样器，对结果影响极大； 2 保温设备不良； 3 洗涤用水不规范。	1 校正加样器；10ul以下加样器好采用进口产品（芬兰、法国等）； 2 仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳； 3 必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。 4 认真阅读使用说明书。
样品加样	1 加样不准确； 2 没有混匀。	1 加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。 2 加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。
洗涤	洗涤不彻底	1 每次注水洗涤，应静止30秒钟； 2 选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分； 3 可选用塑料洗涤瓶。
加酶反应	漏加	滴加后，认真检查各孔
试剂保存	保存不规范	一定要在2-8℃存放。不得过高，也不得冻存（冻存后，酶液将失效）。
对照品	对照品为冻干品	按对照管标示，加入相应体积的去离子水或蒸馏水复溶，充分溶解混匀。可按说明书使用。