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首页 > 原装ELISA试剂盒 > Goat Elisa kit>山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

[商品编号]:HY-13005K

[CAS]:无

[英文名称]:Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:TSZ

[库  存]: 1000 盒

[数  量]:

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  • 山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 48T/96T 99.99% ¥4800 1000 立即订购

产品描述

 

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T/48T

使用目的:

本试剂盒用于测定动物种属血清、血浆及相关液体样本中含量

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算样品浓度。

试剂盒组成 

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(80ng/L

0.5ml×1

3

标包被

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2张  

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求 

·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。

·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。

·样本收集后应立即-20℃保存,若长期保存应-70℃。

·样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足好提供500ul以上。

·客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与技术支持沟通确认。

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

40 ng/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

20 ng/L

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

10 ng/L

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

5 ng/L

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

2.5 ng/L

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结:

 

 

计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒代测周期等内容

服务编号  服务项目        内容说明          提交结果    周期

RGSc1     间接法ELISA检测 客户提供检测材料 检测试验报告 1周


RGSc2     夹心法ELISA检测 客户提供检测材料 检测试验报告 1周

                          和检测试剂盒

RGSc3     竞争法ELISA检测 客户提供检测材料 检测试验报告 2周

 

                          和检测试剂盒

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒保存条件及有效期

1试剂盒保存:2-8

2.有效期:6个月

1)未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2)使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。

温馨提示:试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

 

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