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植物组织培养出现污染了怎么办?
发布时间:2022/9/6 11:33:05 已浏览次数: 347 次

 在处理植物组织培养过程中,一不小心会出现各种污染,到底该如何预防呢?恒远生物技术人员为大家总结,一起来看看吧!


一、污染原因判断:
1.培养基污染:若污染菌类是零星分散在培养基中,则可确定是人为引起的污染。比如培养基灭菌不彻底,开瓶时间过长,灭菌后存放时间过长等; 高温蒸汽灭菌器的温度、压力、时间没有正确设置;过滤灭菌过程中滤膜孔径选择、过滤灭菌器的灭菌处理、过滤灭菌操作等均会影响培养基的灭菌效果。措施:严格按照实验要求,灭菌规程操作。

2.外植体污染:若污染菌类是从材料周围长起,且发生在 5 天以后,则说明是材料带的内生菌。可能是接种用具灭菌不彻底,接种时材料被污染;若从培养基以下开始长菌,发生时间较早,且有从里向外的趋势,则说明是切口引起的污染,原因可能是未剪去两个切口或者虽剪去切口但是所用器具带菌;或者是未及时发现污染苗,接种过程中引起交叉污染;措施:取材时应仔细选择,以减少污染的发生。

3.操作环节污染:接种室是否清洁、干燥、密封,是否经常用紫外灯照射、甲醛熏蒸、70% 的酒精喷雾杀菌等;超净工作台摆放物品杂乱,长时间不换滤网,导致净化能力降低;接种用具灭菌不彻底引起污染;操作不正确等。

措施:每次接种前半个小时,用 20% 的新洁尔擦洗室内设备、工作台面,再用紫外灯照射 20 min。还可以喷洒 70% 的乙醇进行消毒。除了培养基、接种材料、器具和用具保证无菌外,同时在接种时还需要严格进行无菌操作。

二、出现污染后处理措施:
1.真菌污染后,如果已形成孢子,则必须经高压灭菌后扔掉;若使细菌污染,只要及时发现,将材料上部未感染菌的部分剪下转接,材料仍可以用。

2.用抗生素等杀菌药剂的处理。但至今还未发现哪种抗生素能够对各种菌都有效,并且常常也会影响植物材料的正常生长分化。另一些药剂,虽有的杀菌效果好,但往往容易引起盐害,也无法利用。

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