如何用 Origin 计算 ELISA 实验结果？
发布时间:2021/5/13 10:56:52 已浏览次数: 802 次

ELISA实验终于做完了，结果被计算难倒了，作为科研人绝不认输，今天恒远小编就给大家分享一下，如何用 Origin 计算 ELISA 实验结果。作为 ELISA 的最后一步，检测结果的计算对整个实验十分重要，一不小心就前功尽弃了......

以夹心法为例：

1. ELISA 的样本通常要设置 1~2 个复孔进行检测，分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的 20%。

2. 样本的 OD（吸光度）平均值要减去标准品浓度为 0 时的 OD 平均值。

3. 建立标准曲线。

在对数坐标图上拟合四参数的逻辑函数曲线（X 轴上为标准品浓度，Y 轴为对应的OD值）。推荐使用 origin 软件。详细步骤如下：

第一步：输入 OD 值和标准品浓度

第二步：选择拟合曲线类型

选中输入的数值框，按如下操作依次点击选项。

第三步：勾选「find specific X/Y」

完成上述操作后，点击 Fit 按键，拟合曲线和相关信息将自动生成（如第四步所示）

第四步：查看标准曲线信息（如参数值，R-Square 等）

第五步：设置坐标轴类型为对数

双击第四步中的拟合曲线图，对其进行编辑。双击 X 轴、Y 轴设置坐标类型为「Log10」。

第六步：根据标准曲线计算样本浓度

选择第四个工作表（Fit NLF Find X from Y1），在左列输入样本的 OD 值，对应的浓度将在右列自动生成。

如果样本的 OD 值超出标准曲线的上限，请在实验前适当稀释样本以获得精确结果。在分析数据时，样本实际浓度应为标准曲线上获得的浓度乘以稀释倍数。

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