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细胞培养液选配关注点
发布时间:2018/12/14 11:24:25 已浏览次数: 710 次

  培养液是人工模拟细胞体内生长的生存环境,对于细胞培养起着关键性作用.

1.选择培养基没有一定的标准,某种培养基可以适合多种细胞,某种细胞也可以在不同培养液中生长.但是,建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基.可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询.
 
2.1640的确是非常便宜的培养基,也很好用.但是,它的缓冲力zui弱,所以有时会对细胞的生长状态有影响,尤其是一些实验室长期传代状态不好的细胞.有条件还是用DMEM培养基.
 
3.一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,放入4度冰箱.应该在2到3周内用完它.因为,一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解.2-3周后就降解完了.
 
4.培养基的pH值随着碳酸氢钠量的增加,呈抛物线增长,当碳酸氢钠加到一定量时,pH变化越来越小.而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加,呈直线增长,碳酸氢钠量越大,渗培养基变成了高渗溶液,细胞会脱水萎suo滴.(ATCC推荐大部分细胞添加碳酸氢钠为1.5g/L)
 
5.胎牛血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,2~3周就降解了.可将1瓶500ml的血清,每次40~45ml分装于无菌50ml离心管中.
 
6.血清的解冻和细胞的解冻正相反:细胞是越快越好;血清是越慢越好.血清解冻步骤:-20℃或–70℃冰箱拿出来,放到4℃冰箱,放一天,慢慢融化.
 
7.进口的胎牛血清,一般不需要热灭活,因为会造成沉淀物显著增多,且会影响血清的品质.这些沉淀物在显微镜下观察,像是“小黑点”,常常误以为是血清遭受污染.
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