人白介素6（IL-6）ELISA检测试剂盒样品收集及保存方法
发布时间:2016/7/15 9:37:02 已浏览次数: 1364 次

    人白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒为我司的热销产品,近日,有客户来电就人白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒样品收集 处理及保存方法提出咨询,我司技术部整理分析如下：

样品收集 处理及保存方法

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激.使用不含热原和内毒素的试管.收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离.

2）血浆-----EDTA 柠檬酸盐 肝素血浆可用于检测.1000×g离心30分钟去除颗粒.

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物.

4）组织匀浆-----将组织加入适量shengli盐水捣碎.1000×g离心10分钟,取上清液

5）保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻.尽可能的不要使用溶血或高血脂血.如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤.不要在37℃或更高的温度加热解冻.应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.

操作步骤：

 1）使用前,将所有试剂充分混匀.不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差.

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数.每个标准品和空白孔建议做复孔.每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔.标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内.

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔 加入待测样品50ul于反应孔内.立即加入50ul的生物素标记的抗体.盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时.

4）甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟.

6）甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.

7）每孔加入底物A B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟.避免光照.

8）取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果.

9）在450nm波长处测定各孔的OD值.

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