我司技术员根据自身经验总结了一篇ELISA实验心得及操作技巧,发布出后得到了业内人士的高度关注。本周就ELISA试剂盒的显色弱问题我司的ELISA咨询顾问给出了具体分析
ELISA显色弱的可能原因 | 对应的解决方法 |
超过有效期的产品可能会产生很弱的信号 | 检查产品的有效期 |
加入试剂的体积和时间有误 | 确定所使用的每一个试剂的体积正确的和加入的时间是适当的 |
试剂、样品用前未能平衡 | 用前试剂、样品置室温平衡10分钟左右 |
缩短孵育时间能使实验的信号变弱 | 检查孵育的时间 |
在温度变化的环境内孵育酶标板 | 确定孵育的温度,应避免温度的变化 |
使用了被污染的试剂 | 检查试剂是否被污染 |
标准品/标本制备方法不规范 | 检查标准品/标本的制备,标准品应按说明书进行复溶和稀释。低温贮存的标本避免反复冻融,严禁使用溶血标本。样品用NaN3防腐,抑制了酶的反应 |
显色底物制备不规范 | 检查底物的制备,如体积是否正确,混合是否恰当充分 |
检测时间不当 | 是否在规定的时间内检测 |
仪器设定不正确,滤光片不匹配 | 仪器是否设定正确,滤光片的使用等 |
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