如何验证ELISA酶标板可靠性
发布时间:2017/3/2 10:48:12 阅读次数：1014

随着科研事业的崛起，越来越多的人选择ELISA检测法来做实验，虽说ELISA实验的原理及操作简单，但是由于实验的特殊性，各个方法也都是影响到实验结果的因素之一。有操作员反应：做了很多次ELISA实验，每次都能够得到线性比较好的标准曲线，但是同样浓度的标准品每次的OD值都不一致，猜可能是酶标板的问题，有什么方法可以快速验证酶标板的可靠性吗？

我公司实验技术专员解读【ELISA酶标板可靠性】的验证原理：

ELISA本身灵敏性很高，每次做出来的值不一样很正常，特别是od值比较大的时候更是差别很大，但是只要不要偏差太大就好，一般偏差要求10%内吧，好的数据是3%内。

首先要稳定所有的条件，不同的条件下做的板子读值不一样很正常。在同样条件下同批次的板子，如果测定不一样，就是包被问题或者保护剂的问题，但这两个都是各个试剂盒的机密，最好看看文献里别人怎么做的。

其次每次实验的标曲上同一浓度样品的OD值不一样是很正常的，这与抗原抗体反应体系、作用时间、显色时间等等一系列的因素有关。鉴定该ELISA体系是否可靠，最关键的指标是加标回收率和稀释线性，如果你怀疑的话可以做一下。

一般来说，国外知名厂商的ELISA试剂盒是没有问题的。同时你还要看一下说明书中ELISA试剂盒的灵敏度，如果样品浓度低于该检测下限，则无法检测到，这是很正常的现象，并不是非要每个样品都要测出值才可以。