恒远解析:样本的采集及贮运操作不当会影响ELISA实验结果
发布时间:2016/7/13 9:33:42 阅读次数：1164

    ELISA（酶联免疫试验）以其灵敏度较高、特异性好的特点已广泛用于科研实验及临床，越来越多科研单位选择用ELISA实验方法完成研究课题，所以，ELISA就有较大的科研前景。实验的第一步就是要准备好样本，样本的收集跟保存听上去貌似很简单，但不乏有许多客户是因为样本的收集跟保存没做好而影响实验结果。上海恒远生物科技有限公司作为专业的ELISA试剂盒厂家必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。才能全方位为客户提供最优质的服务。优质的试剂 、好的仪器和正确的操作是保证ELISA试剂盒检测结果准确可靠的必要条件。

下面就样本收集跟保存两点恒远生物提几个建议：

 1.严重溶血，以HRP 为标记的ELISA 测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性；

2.混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净；如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应：

3.标本凝固不全 ，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；

4.采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染：塑料试管能吸附抗原物质，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。

    血清标本宜在新鲜时检测，严重溶血标本禁用。一般说来，在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需－20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落，所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存；最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管；并使用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关；EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性；血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。