技巧传授：加热法提取牛血清白蛋白方法
发布时间:2016/5/26 9:34:23 阅读次数：1543

        今天上海恒远为您分析整理出了一则关于加热法提取牛血清蛋白方法的技巧传授，下面就来看今天的重点实验内容吧：
1. 牛血：取自绵阳近郊屠宰场，以柠檬酸三钠为抗凝剂，血液收罗后随即疏散出血浆备用.
2. 试剂：【牛血清白蛋白】、溴甲酚氯购自上海恒远生物科技有限公司。
3. 白蛋白含量测定：接纳溴甲酚氯法，以牛血洁白蛋白为尺度[4].1.5白蛋白纯度的测定接纳醋酸纤维素薄膜电泳法。
4. 吸光度值的测定：用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403nm处的光汲取值，然后折算成浓度为10g/L时牛血洁白蛋白的光汲取值，用A403表现。
5. 白蛋白的生产工艺：奇怪抗凝牛血用LC-6型大容量离心机(3000r/min×30min)离心疏散出血浆，加肯定量的蒸馏水稀释，再参加恰当的稳固剂和蛋白沉淀剂，然后按下述要领举行实行处理惩罚：
 ① 差异pH值溶液对白蛋白的收率和质量的影响。在别的条件牢固的环境下，试验差异pH值对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
 ② 差异加热保温时间对白蛋白的收率和质量的影响。在选定的pH值和别的条件牢固的环境下，试验差异加热保温时间对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
 ③ 差异稀释倍数对白蛋白的收率和质量的影响。在选定的pH值和保温时间及别的条件牢固的环境下，试验差异稀释倍数对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
 ④ 差异加热温度对白蛋白的收率和质量的影响。在别的条件选定的环境下，试验差异加热温度对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
·【牛血清白蛋白】的用途有哪些？
  1. 用于生化研究、遗传工程和医药研究
  2. 用作医药保健食品、调味品
  3. 维持渗透压、pH缓冲、载体作用
  4. 在PCR体系中有助于Taq酶的稳定性及活性，可以提高PCR的效率
·生产方法：以牛血为原料分离出血清，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得。
·贮存方法
    每10克加100毫升水进行溶解，或用 PBS溶解也可，视用途而决定。然后分装成小支。若不使用防腐剂可贮存在零下20或30摄氏度的恒温柜中，若使用防腐剂（如0.1%叠氮化钠）则可贮存在零上4摄氏度的环境下。一般可存放数月不变质。防腐剂可能对牛血清白蛋白的效果造成影响，应慎用。
·购上海恒远血清优势有哪些？
  1. 品质有保证，三十年的血清生产经验完全符合cGMP的生产要求，符合USDA标准。
  2. 种类齐全，可以满足所有血清用户的需求。
  3. 多种血清都提供了热灭活的包装，减少了实验室自行热灭活的工作，并最大限度降低了热灭活对血清的负面影响。
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